病理相关试剂

病理研究主要是通过观察显微镜标本的组织、细胞,以阐明疾病的发生及发展过程。观察时,为了可视化靶组织、细胞、分子(蛋白/核酸等),会使用染料染色、免疫组织染色和原位杂交等方法。

FUJIFILM Wako可提供用于病理研究的不同步骤中的多种必需试剂。

◆从标本制作到显微镜观察的流程(利用光学显微镜观察石蜡切片情况)

由于制成标本的组织、细胞或染色方法不同,试剂的处理也各不相同,一般情况下从标本制作到显微镜观察的过程如下:

解剖

从动物中切除组织,根据切除的组织进行灌注固定。

固定

为了制作出可长时间保存且尽可能接近活体状态的标本,会固定组织中的物质(以蛋白为主)。

处理试剂:组织固定液

(脱钙/脱脂)

对骨头等硬组织进行脱钙,对大脑、皮肤、脂肪等含脂肪多的组织进行脱脂处理。

处理试剂:脱钙剂

脱水

对于石蜡包埋的情况,首先使用酒精对组织中的水分进行脱水,之后用与石蜡相溶的中间剂置换出酒精。

处理试剂:组织脱水溶液/中间剂(置换剂)

包埋

由于很难直接将柔软的组织切成薄片,为使其硬度适宜,使用石蜡等包埋。

处理试剂:包埋剂

切片

对包埋试剂染色,并切成可观察的薄片。

染色

使用染料或抗体、探针对切片后的试剂进行染色、标记。有时会在前处理时进行脱蜡、抗原激活、封闭等。

另外,通过使用脱色试剂可以对已经染色的试剂进行脱色、染成其他颜色。

处理试剂:抗原激活试剂/组织标本脱色试剂

封片

添加封片剂的目的是为了固定·保存或长期保存玻片上的试剂,有时需要对非水溶性封片剂进行脱水。

处理试剂:封片剂

观察

用显微镜观察已制成的标本

◆产品列表——病理相关试剂

一、组织固定液

(1)光学显微镜用固定液

中性缓冲福尔马林固定液

产品编号

产品名称

等级

包装

062-01661

10% Formalin Neutral Buffer   Solution10%福尔马林中性缓冲液

for Tissue Fixation

1 L

068-01663

5 L

060-01667

20 L

069-02391

15% Formalin Neutral Buffer   Solution15%福尔马林中性缓冲液

for Tissue Fixation

1 L

065-02393

5 L

067-02397

20 L

060-01721

20% Formalin Neutral Buffer   Solution20%福尔马林中性缓冲液

for Tissue Fixation

1 L

066-01723

5 L

068-01727

20 L

Mildform

产品编号

产品名称

等级

包装

133-10311

Mildform® 10N免疫组化固定液 Mildform® 10N

for Pathology Research

1 L

131-10317

20 L

132-14301

Mildform® 15N免疫组化固定液 Mildform® 15N

for Pathology Research

1 L

130-14307

20 L

136-10041

Mildform® 20N免疫组化固定液 Mildform® 20N

for Pathology Research

1 L

134-10047

20 L

132-10521

Mildform® 10NM免疫组化固定液 Mildform® 10NM

for Pathology Research

1 L

130-10527

20 L

139-10531

Mildform® 20NM免疫组化固定液 Mildform® 20NM

for Pathology Research

1 L

137-10537

20 L

其他固定液

产品编号

产品名称

等级

包装

034-17711

Carnoy Solution  卡诺溶液

for Tissue Fixation

1 L

023-17361

Bouin SolutionBouin固定液

for Pathology Research

1 L

263-01991

Zamboni SolutionZamboni固定液

for Pathology Research

1 L

161-20141

4% Paraformaldehyde Phosphate   Buffer Solution4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液

for Tissue Fixation

100 mL

163-20145

500 mL

290-63201

PLP Solution SetPLP 溶液套装

for Tissue Fixation

250 mL

(2)电子显微镜用固定液

电子显微镜用固定液

产品编号

产品名称

等级

包装

154-01014

Osmium(VIII) Oxide氧化锇(VIII)测试剂

for Electron Microscopy

1 g

154-01151

2% Osmium(VIII) Oxide Solution2%四氧化锇溶液

for Electron Microscopy

5 mL×5A

157-01141

4% Osmium(VIII) Oxide Solution4%四氧化锇溶液

for Electron Microscopy

5 mL×5A

072-02262

20% Glutaraldehyde Solution20%戊二醛溶液

for Electron Microscopy

25 mL

166-23251

Paraformaldehyde低聚甲醛

for Electron Microscopy

100 g

168-23255

500 g

安瓿型固定液

产品编号

产品名称

等级

包装

071-02031

10% Glutaraldehyde Solution10%戊二醛溶液

for Electron Microscopy

2 mL×5A

(3)分装10%中性福尔马林缓冲溶液

产品编号

产品名称

等级

包装

066-06821

10% Formalin Neutral Buffer Solution10%福尔马林中性缓冲溶液

for Tissue Fixation

8 mL×100

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产品名称

等级

包装

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PathoClean

for Pathology Research

1 L

169-28327

PathoClean病理标本二甲苯替代品

18 L

164-28492

PathoMount

for Pathology Research

25 mL

168-28495

500 mL

二、脱钙液

组织脱钙液系列

产品编号

产品名称

等级

包装

112-00651

KalkitoxKalkitox脱钙液

for Pathology Research

1 L

047-21911

Decalcifying Solution APlank-Rychlo脱钙液A

for Pathology Research

1 L

041-22031

Decalcifying Solution B脱钙液B

for Pathology Research

1 L

135-17071

Morse Solution

for Pathology Research

1 L

062-04025

5% Formic Acid (for Decalcification)5%甲酸(脱钙用)

for Pathology Research

500 mL

146-07075

8% Nitric Acid (for Decalcification)8%硝酸(脱钙用)

for Pathology Research

500 mL

205-14905

5% Trichloroacetic Acid Solution (for Decalcification)5%三氯乙酸溶液(脱钙用)

for Pathology Research

500 mL

196-11985

5% Sodium Sulfate Solution (for Decalcification)5%硫酸钠溶液(脱钙用)

for Pathology Research

500 mL

三、组织脱水溶液

组织脱水溶液系列

产品编号

产品名称

等级

包装

203-13747

Tissue Dehydration Solution组织脱水液

for Pathology Research

18 L

200-13877

Tissue Dehydration Solution A (ACE)组织脱水液A (ACE)

for Pathology Research

18 L

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Tissue Dehydration Solution, Low-Methanol Type组织脱水液,低甲醇型

for Pathology Research

18 L

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95v/v% Tissue Dehydration Solution A (ACE)95v/v% 组织脱水液A (ACE)

for Pathologic Cytodiagnosis Research

18 L

四、中间剂(置换剂)

(1)病理用二甲苯

产品编号

产品名称

等级

包装

245-00717

Xylene, with Molecular Sieves Pack二甲苯,带分子筛包装

for Pathology Research

15 kg

(2)PathoClean

产品编号

产品名称

等级

包装

161-28321

PathoCleanPathoClean病理标本二甲苯替代品

for Pathology Research

1 L

169-28327

18 L

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PathoMount

for Pathology Research

25 mL

168-28495

500 mL

(3)Lemosol/ Lemosol A

产品编号

产品名称

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包装

122-03991

Lemosol®右旋柠檬烯

for Pathology Research

1 L

128-03993

3 L

120-03997

18 L

120-04411

Lemosol® A右旋柠檬烯A

for Pathology Research

1 L

126-04413

3 L

128-04417

18 L

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129-04545

Lemosol Coagulant

for Solidification of Used Lemosol

500 g

五、包埋剂

(1) Pathoprep系列

产品编号

产品名称

等级

包装

167-20501

Pathoprep 546

for Pathological Tissue Embedding

2kg×3

162-18961

Pathoprep 568

for Pathological Tissue Embedding

500 g×12

165-19551

Pathoprep 580

for Pathological Tissue Embedding

2 kg×3

(2)Osteoresin Embedding Kit 包埋试剂盒

产品编号

产品名称

等级

包装

297-56001

Osteoresin Embedding KitOsteoResin™包埋试剂盒

for Pathological Tissue Embedding

1 kit

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其他包埋剂

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Collodion (5%)硝化棉(5%)

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Collodion (10%)硝化棉,硝酸纤维素

和光一级

500 mL

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Gelatin明胶

和光一级

500 g

电子显微镜用包埋剂

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056-03841

Ethylene Glycol Diglycidyl   Ether乙二醇二缩水甘油醚

for Electron Microscopy

200 g

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500 g

058-02985

Epon 815环氧树脂815

for Electron Microscopy

500 g

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WE 174WE 174电子显微镜用试剂

for Electron Microscopy

500 g

237-00771

WE 812WE812电子显微镜用试剂

for Electron Microscopy

200 g

固化剂

产品编号

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040-16251

Dodecenylsuccinic   Anhydride2-十二烯基丁二酸酐

for Electron Microscopy

200 g

042-16255

500 g

加速剂

产品编号

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204-06263

2,4,6-Tris(dimethylaminomethyl)phenol2,4,6-三(二甲胺基甲基)苯酚

for Electron Microscopy

25 mL

明胶,胶囊

产品编号

产品名称

等级

包装

071-01791

Gelatin, Capsules No. 00明胶,胶囊No. 00

for Electron Microscopy

100个

六、抗原激活试剂

产品编号

产品名称

等级

包装

097-06192

ImmunoSaver

for Immunohistologic Staining

25 mL

七、组织样本脱色液

产品编号

产品名称

等级

包装

043-34561

deColorizing Solution 1组织标本脱色剂溶液1

for Pathology Research

250 mL

046-34551

deColorizing Solution 2组织标本脱色剂溶液2

for Pathology Research

250 mL

八、封片剂

(1)Super Clear Mount

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190-18661

Super Clear MountSuper Clear Mount 封片剂

for Cellbiology

10 mL

(2) Softmount

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010-13811

Apathy's Mounting Media, Soluble

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100 mL

038-01045

Canada Balsam加拿大树胶

和光一级

500 g

◆相关链接

病理学试剂

参考文献

1)山田和順 著, 組織化学 初学者のための基礎と実際, 南江堂, 1987

2)高田邦昭, 斎藤尚亮, 川上速人 編, 第5版 実験医学別冊 染色・バイオイメージング実験ハンドブック, 羊土社, 2012

3)高橋英機 監修, 大久保和央 著, 細胞・組織染色の達人, 羊土社, 2018

THE END
0.(一)一般光学显微镜术《组织学与胚胎学》固定后的组织块(约3~5mm3大小)用石蜡、火棉胶或树脂等包埋(embedding)成硬块,以切片机(microtome)切成5~10μm厚的组织切片(tissue section),切片贴在载玻片上经脱蜡等步骤后进行染色。组织块也可立即投入液氮(-196℃)内快速冻结,用恒冷箱切片机(cryostat)制成冷冻切片(frozen section),这种方法制片迅速,细胞内jvzquC41yy}/|‚xl0eun0ls1nkrvp|mwlk5{wƒmkzwkzwyjkvcoywn4369;3;7mvon
1.封片剂详细说明书注意事项不良反应用法用量【通用名称】: 封片剂 【汉语拼音】: FengPianJi 【成份】: 本品主要成分为丙烯酸树脂(C3H4O2)。 【适应症】: 适用于各种细胞、组织石蜡切片、冷冻切片、火棉胶切片、树脂切片、涂片、印片的固定。 【规格】: H-H0401 100ml/瓶。 【执行标准】: YZB/鄂(鄂州)0009-2013 【批准文号】: 鄂(鄂州)食jvzquC41ycvzrt35;0tfv8rcpwgm1;7844;5
2.万疆IF/ICC免疫荧光实验步骤技术文章(五)封片及荧光观察 标记好荧光的细胞片原则上可以直接进行观察,特别是有时候封片不当反而使得前功尽弃。但在绝大多数情况下,为了保存结果,以便进一步观察、照像、统计分析等,需作封片处理。常规的方法是采用甘油或中性树脂封片,为了增强封片的效果,往往需要在封片时添加特殊的抗荧光淬灭剂。 jvzquC41yy}/jkjcp4dqv4uv384;@71ctzjeuja4371:;3jvor
3.2023年第一次医疗器械产品分类界定结果汇总牵开器采用镍钛丝、硅橡胶制成,输送器采用丙烯腈-苯乙烯-丁二烯共聚物、嵌段聚醚酰胺树脂、聚四氟乙烯和医用不锈钢制成,可选配的牵开装置采用聚碳酸酯制成。为一次性使用无菌产品。使用时,输送器顶端到达脑组织病灶部位后,扣动扳机使装载在输送器里的牵开器释放,牵开器通过自身膨胀撑开脑组织,建立可以进入操作器械jvzquC41yy}/prkfe0usi7hp1fosglyqt{5xgk4pkhjd1kxjhh5znz}d|jmm1z}zziq0huof1463598522?369>74;6847mvon
4.探秘之小鼠动情期区分实验技术前沿资讯镜下观察,细胞均匀,背景干净无杂质,上色程度理想,即可封片,拨片中央滴加中性树脂后盖盖玻片,平放静至过夜后切片盒内保存。 涂片区分动情期? 首先我们要知道阴道脱落细胞主要有3 种:白细胞,有核上皮细胞,角化细胞。 1.动情前期涂片大部分是有核上皮细胞,偶有少量角化细胞; jvzquC41urkdv{zonchptjyqtkkt0knqqp4dqv3ep1gsvrhng1=65k7;23=6e>
5.RNA聚合酶Ⅰ抑制剂阻止动脉新生内膜形成的药理作用及机制研究中性树脂封片、干燥,显微镜下,每孔随机选取5-10个视野计数阳性细胞和总细胞数观察并保存影像。3.细胞Caspase 3/7活性检测将MOVAS接种于96孔板中,次日给予梯度浓度的CX-5461处理,并设立猩孢霉素组为阳性对照组,5%DMSO组为阴性对照组。用预先配好的Caspase-Glo 3/7工作液孵育细胞1小时,随后将样品移入不透光的96jvzquC41ycv/ewpk0pku1uzpygt.396929669A3pj0nuou
6.大鼠短暂脑缺血后海马区c后中性树脂封片。 l 方法制作大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。大鼠麻醉7原位杂交实验步骤(1)组织切片于02N盐 后,将其仰卧固定。分离左颈总动脉(CCA)、颈内酸中浸10 rain; min,Mgcl2一PBS洗2次,每次10 动脉(ICA)及颈外动脉(ECA)并挂线备用,结扎 ECA与CCA,用动脉夹夹闭ICA远心端后.迅速 4%多聚甲醛固定20 于jvzquC41o0hpqt63:0ipo8mvon532:<129671:7287862A3ujvs
7.生物小白必看:13种组织切片染色实用攻略——原理、步骤、结果与注意事•封片质量:中性树脂封片时,避免树脂过稀(易流动)或过浓(难涂匀),确保无气泡。 •污染预防:苏木精和伊红溶液需每周过滤一次,去除沉淀物。 •低温处理:冬季室温低于14℃时,二甲苯需置于30℃温箱预热,确保脱蜡均匀。 •蓝化重要性:蓝化步骤确保细胞核呈深蓝色,增强核质对比度。 jvzquC41dnuh0lxfp0tfv8JaOcmjehHwdg5bt}neng5eg}fknu526@<4;581
8.红木真假鉴定是如何检测的?如果要制成切片,则用中性树脂封片,贴上标签,阴干或低温烘干即可。 2.3木材构造特征拍摄 2.3.1横切面宏观构造(体视显微镜)照片制作 用锋利小刀或单面刀片将试样的横切面削平削光滑,在数码体视显微镜下拍照木材横切面原色实体构造图,使其保持木材原有的真实材色,导管内含物的形态与颜色,各种细胞组织的形态。照片的jvzquC41o0726?<0eqs0r{tfwez0f:6942;6:7mvo
9.pEGFPING4抑制裸鼠皮下人U87移植瘤生长及肿瘤血管生成梯度乙醇逐级脱水,二甲苯透明,中性树脂封片,光镜下观察并摄影。参考有关文献[7]对各组裸鼠肿瘤组织CD34染色切片进行微血管密度(microvessel density,MVD)计数:染成棕色的血管内皮细胞或血管内皮细胞群,只要它们与邻近微血管、肿瘤细胞或其它结缔组织分开,就视为一个微血管;同一个血管的“头”和“尾”正好在一个切面上,作两个微血管jvzquC41yy}/h8830ipo8ucig532:6124621:;:4:>:57xjvor
10.《中国幽门螺杆菌研究》检测幽门螺杆菌感染几种方法的比较取出切片,热水彻底冲洗,脱水,透明,中性树脂封片。100×10倍镜下观察Hp,其在淡黄色背景上呈棕色或褐色弯曲状物,易辨认。⑥Giemsa染色:将脱蜡切片于Giemsa稀释液中浸染20min,待组织呈蓝色,蒸馏水漂洗,PBS液分色约3min~5min,透明,中性脂封片。100×10倍镜下观察。Hp呈深蓝色弯曲状物,较易分辨。⑦菌量分级:菌jvzq<84yyy4ecƒmqpij0lh1nkrvp|mwlk5{jxsiiwuzq~rgpn{pijslwpbpsnw1;<3/<7/90nuou
11.晶状体蛋白αb在结直肠癌组织中的表达及其临床意义H2O2室温下孵育30 min,PBS冲洗5 min×3次;动物非免疫羊血清封闭30 min,滴加Cryab一抗(1∶100),放于湿盒中4℃过夜,PBS冲洗5 min×3次;滴加HRP标记聚合物的二抗工作液,室温孵育1 h,PBS冲洗5 min×3次;DAB显色,显微镜下观察,适时终止反应,自来水充分冲洗;苏木精复染,脱水透明;1%盐酸乙醇褪蓝;中性树脂封片jvzquC41yy}/vlxwti4ptp4ctvodnn4320=62@4322=.;=7604627986:
12.丁酸钠对高尿酸血症模型小鼠肠道屏障的保护作用的H2O2-甲醇溶液在暗匣中避光室温孵育10 min,阻断内源性过氧化物酶活性;以体积分数0.10的羊血清37 ℃下孵育30 min,封闭非特异性抗原;滴加一抗(ZO-1 1:100稀释,Occludin 1:500稀释),湿盒内4 ℃下孵育过夜;滴加二抗,37 ℃下孵育30 min,DAB显色5~10 min;苏木素复染,乙醇脱水,二甲苯透明,中性树脂封片。jvzquC41lrsff7vfw0kew7hp1ET0393355<31s3lroke0;5452913?
13.颅脑弥漫性轴索损伤9篇(全文)底物呈色反应剂采用DAB。呈色反应后,切片经逐级脱水并中性树脂封片。每例标本测5张切片,取被检各区之均值。显微镜观察拍照。 1.3图像分析:在日本产NikonEclipse80i显微镜下观察结果,并用NikonDS高分辨率数码像机经NIS-ElementsAR3.0软件拍照。对每个组织切片均通过拍照收集全组织切面图像。结果分析,采用Ver.3.00程序jvzquC41yy}/;B}wgunv0lto1y5jmn~k;k€zjto0jvsm
14.米非司酮联合戊酸雌二醇治疗围绝经期功血的疗效(妇科疾病论文染色法观察天枢注射芥子油后局部组织病理学变化完成舔舐行为实验后,大鼠麻醉并进行灌流,取天枢局部组织经中性甲醛固定,石蜡包埋,切片,厚度为,脱蜡至水,经苏木素染色,盐酸乙醇分析,氨水返蓝,中性树脂封片。显微镜下观察天枢组织病理变化。芥子油是基础研究中常用的种致炎剂,能够激活局部的类伤害感受器引起以痛敏及热敏jvzq<84yyy4xql=:0eun1233768:9690jznn
15.绵阳市中心医院骨科脊柱专科网上预约挂号专家门诊5. 钙结节染色 MSCs经PEMF作用,待培养板中出现圆形或卵圆形结节后,取出盖玻片,用PBS洗涤3 次, 75%酒精固定30 min,将固定后的细胞玻片置于茜素红染液中染色5~10 min, 1%醋酸溶液快速冲洗,不同浓度的乙醇依次脱水,二甲苯透明,中性树脂封片,摄像记录。四、统计学分析应用SPSS 11. 0统计软件,采用单因素方差分析jvzquC41yy}/jjtfh0ipo8mquroucu47:;5lg|mk1;<397mvon
16.阿拉丁试剂伊红染色液(醇溶,1%)(六)二甲苯 (II) 透明1min,中性树脂封片。 (七)显微镜下观察,细胞浆呈粉红色或红色。 四、进行其它染色: (一)如果进行免疫荧光染色或进行Hoechst等荧光染料的染色,在伊红染色液染色后70%乙醇洗涤2次。 (二)PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。 jvzquC41yy}/cufffkt.g7hqo1€ials1g9=59A=0jvsm