碧云天的脂滴绿色荧光检测试剂盒(BODIPY 493/503),英文名为Lipid Droplets Green Fluorescence Assay Kit with BODIPY 493/503,也称BODIPY 493/503 Staining Kit或Green Neutral Lipid Stain,是一种基于绿光探针BODIPY 493/503来检测细胞内脂滴(Lipid droplets)的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统。
脂滴是由磷脂单分子层及甘油三酯(Triglyceride)、胆固醇酯(Cholesteryl ester,CE)组成的中性脂肪(Neutral lipid)疏水核心构成,广泛存在于动物、细菌、酵母、植物和昆虫细胞中[1]。脂滴能够沿着细胞骨架运动,并与其它细胞器相互作用,在脂类代谢与存储、膜转运、蛋白降解、以及信号传导过程中起着重要的作用。多种代谢性疾病,如肥胖、脂肪肝、心血管疾病及糖尿病、中性脂贮存性疾病和Niemann Pick C疾病等,可能都伴随着脂质贮存的异常[2]。
图1. BODIPY 493/503在磷脂中的激发光和发射光光谱。
本试剂盒所使用荧光探针BODIPY 493/503在水和其它极性溶剂中几乎无任何荧光,一旦与甘油三酯等中性脂肪结合便发出明亮的绿色荧光。使用本试剂盒检测细胞内脂滴的效果参考图2。
图2. 脂滴绿色荧光检测试剂盒(BODIPY 493/503)检测HeLa细胞内脂滴的效果。图A为正常HeLa细胞在显微镜明场下的形态,正常细胞内无明显的脂滴聚集现象,因此经染色后呈较弱的绿色荧光(图B),主要是细胞膜上脂类的染色;图E为使用油酸诱导后细胞在显微镜明场下形态,此时细胞内有很明显的脂滴聚集,细胞内脂滴被BODIPY 493/503染成明亮的绿色荧光(图F)。图C、G为细胞核染色效果,图D、H为脂滴和细胞核的叠加图。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异,本图仅供参考。
对于96孔板中的样品,按照每孔使用100μl染色液计算,本试剂盒的小包装和中包装可以进行1000次和5000次检测;如果用于流式细胞仪检测,按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时,本试剂盒的小包装和中包装可以进行200次和1000次检测;对于6孔板中的贴壁培养细胞样品,按照每孔使用1ml染色液计算,本试剂盒的小包装和中包装可以进行100次和500次检测。
-20ºC避光保存,至少一年有效。BODIPY 493/503 (1000X)和Hoechst 33342 (1000X)须避光保存。
第一次使用时建议适当分装,避免反复冻融。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。