动物科研大小动物实验

小鼠动情周期是雌性小鼠在生殖系统中的周期性变化,通常持续4至5天。这一周期包括了卵泡发育、排卵和子宫内膜准备等过程。与人类的月经周期类似,小鼠的动情周期也是受到内分泌激素的调控,如雌激素和孕激素

怎样区分动情周期?

1. 生殖器官外观:

小鼠的生殖器官在不同的动情周期阶段也会有所变化,如子宫颜色和大小、卵巢大小等;(不过要观察这些的话,务必是要伤害到鼠鼠了!)

2. 行为特征:

小鼠在动情周期的不同阶段会表现出不同的行为特征,如活动性增加、尿液标记物的变化等(这样的观察比较主观,得出的结果也就不那么准确)。

3. 阴道细胞涂片:

可以通过取得小鼠阴道内的细胞涂片,观察阴道上皮细胞的形态变化来确定小鼠的动情周期阶段。在动情周期的不同阶段,阴道细胞的形态会发生变化,如核的形状和大小。

阴道细胞涂片

可以通过取得小鼠阴道内的细胞涂片,观察阴道上皮细胞的形态变化来确定小鼠的动情周期阶段。在动情周期的不同阶段,阴道细胞的形态会发生变化,如核的形状和大小。

1.实验准备

载玻片,棉球,棉棒,显微镊,生理盐水,福尔马林,瑞氏-吉姆萨染液,纯水,中性树脂,显微镜,盖玻片

2.涂片制作

a.将显微镊卷上棉絮,卷为米粒大小,沾湿生理盐水,插入小鼠阴道口0.5-1cm,将镊子贴在阴道壁上从里往外刮10次(保持每只鼠同样力度与次数,大鼠则采用棉棒);

b.将镊子棉球放在玻片中央正上空,滴加生理盐水直至有液滴挂在棉球上而不掉落,慢慢转动棉棒使细胞尽可能多的被洗进液滴里;

c.将液滴从拨片中央往四周平铺开来(棉棒不要触碰到玻片,摩擦会使细胞破裂),自然风干。

3.涂片固定:

光下转动拨片观察涂片刚好风干后(风干太久会使细胞破裂,影响后续效果)放入4%多聚甲醛中固定10min,用纯水洗净残留的固定液。

4.涂片染色:

配置染液前与滴加染液前务必充分摇匀,将玻片残留水分尽量甩干,从旁边滴加染液,用tip头铺平(勿触碰玻片),避光常温孵育10min后(可回收染液,以备观察后还需要复染),清水洗净,镜下观察。

5.封片:

镜下观察,细胞均匀,背景干净无杂质,上色程度理想,即可封片,拨片中央滴加中性树脂后盖盖玻片,平放静至过夜后切片盒内保存。

涂片区分动情期?

首先我们要知道阴道脱落细胞主要有3 种:白细胞,有核上皮细胞,角化细胞。

1.动情前期涂片大部分是有核上皮细胞,偶有少量角化细胞;

2.随着卵泡加速生长,有核上皮细胞逐渐转化成成熟无核角化细胞进入动情期,全部是无核角化细胞或间有少量上皮细胞;

3.随即又开始出现白细胞,而无核角化细胞慢慢减少,此时出现 3 种细胞(白细胞角化细胞有核上皮细胞)同时存在的现象,证明已进入动情后期;

4.随后,角化细胞不断减少白细胞不断增多,转化为以白细胞为主,逐渐进入动情间期;通常见到以角化细胞为主则认为进动情期。

THE END
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