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阿尔新蓝(Alcian blue)染色
一、阿尔新蓝染色原理
阿尔新蓝(Alcian blue,AB),又称阿尔辛蓝[1]、阿利新蓝[1,3,6]、阿利辛蓝[8]、阿辛蓝[5]、爱先蓝[1],是一种类铜钛花青共轭染料,最初用于纺织纤维染色[1]。
1、阳离子染料
Alcian blue 属于阳离子染料,是显示酸性黏液物质最特异的染料[2]。这种阳离子染料与酸性基团结合,即 Alcian blue 与组织内含有的阴离子基团(如羧基和硫酸根)形成不溶性复合物[1,7]。
Alcian blue 由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。该异硫脲基呈中度碱性,使 Alcian blue 带阳离子。Alcian blue 使碳水化合物着色的确切机制不明, 普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。如含羧基和硫酸根的酸性黏液物质的羧基和硫酸根形成不溶性复合物,即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色[1,7]。
2、PH
3、应用
二、阿尔新蓝染色步骤
2、阿尔新蓝染色:在石蜡切片上滴加阿尔新蓝染色液(Alcian blue 8GX,购于赛业生物公司[2]),完全覆盖标本,37℃ 染色 1h[2],自来水冲洗。
三、共染
1、PAS-AB
阿尔新蓝(Alcian blue,AB)染色可与过碘酸雪夫(Periodic acid-Schiff,PAS)共染,以鉴别 PAS 反应阳性产物是中性糖蛋白还是酸性糖蛋白。
2、阿尔新蓝-核固红染色[7]
阿尔新蓝-核固红染色中,弱硫酸化酸性粘多糖、酸性粘蛋白、透明质酸、唾液粘蛋白呈蓝色;胞核呈红色到粉丝;胞浆呈浅粉色[8]。