做脂肪细胞、肝细胞相关研究的小伙伴，是不是总被一个问题困扰 —— 细胞里的脂滴明明存在，油红 O 染色后却要么背景一片红、要么脂滴显色模糊？作为摸爬滚打多年的医学科研人，我太懂这种 “明明步骤都对，结果却翻车” 的挫败感了。
今天就把细胞油红 O 染色的 “全攻略” 掰开揉碎讲，从基础认知到实操细节，再到试剂盒选购，帮你少走弯路！
一、先搞懂：细胞油红 O 染色，到底是 “干什么的”？
咱们在做肥胖机制、脂肪肝模型、脂肪分化相关实验时，常常需要直观看到细胞内脂滴的数量、大小和分布 —— 这时候，油红 O 染色就是最常用的 “工具” 之一。
它本质是一种脂溶性染料染色技术，专门针对细胞内的中性脂肪（比如甘油三酯）。简单说，就是让染料和脂滴 “精准结合”，让原本透明的脂滴变成醒目的红色，再通过显微镜观察，就能清晰判断脂滴的情况。不管是冷冻切片的组织样本，还是培养的细胞爬片，它都能 hold 住，而且操作不算复杂，成本也不高，所以在科研圈一直是 “刚需技术”。
二、染色原理：为什么油红 O 能 “认准” 脂滴？
很多小伙伴做实验只记步骤，却没搞懂原理，其实懂原理才能灵活应对突发问题。油红 O 染色的核心，靠的是 “相似相溶” 原理 。
油红 O 本身是一种脂溶性偶氮染料，它的分子结构和细胞内的中性脂滴（主要成分是甘油三酯）“脾气相投”。当我们把染料加到样本上时，油红 O 会从水溶液中 “跑” 到脂滴里，像给脂滴 “穿上红色外套”；而细胞的其他结构（比如细胞核、细胞质）不溶于脂溶性染料，就不会被染色（后续复染细胞核时会用苏木素染成蓝色，形成 “红脂蓝核” 的对比，更易观察）。
这里要注意：油红 O 只认 “中性脂肪”，如果你的实验目标是磷脂、胆固醇，那它就不适用了，别选错染色方法哦！
三、实操步骤：一步一细节，避开 90% 的坑
下面为培养细胞爬片染色步骤
1. 步骤
2. 染色结果
3. 注意事项（避坑指南）
四、试剂盒如何选
不想自己配试剂？直接买商品化试剂盒更省心！挑的时候注意这几点：
五、科研人闲聊
说到油红 O 染色，我想起去年见过的一个医学生师妹。她第一次做脂肪细胞分化实验，油红 O 染色时孵育时间多了 5 分钟，结果整个爬片红得像块 “红布”，脂滴和背景根本分不清。师妹看着显微镜，眼圈都红了，说 “熬了 3 天养的细胞，全白费了”。
我赶紧帮她分析：其实不是细胞白费了，是分化步骤没掌握好。后来我们一起调整了染液浓度，把孵育时间缩短，再用 60% 异丙醇慢慢分化，最后终于看到了一个个清晰的红色脂滴。师妹当时兴奋地说 “原来不是我笨，只是没找对方法”。
其实不管是医学生还是临床医生搞科研，都有过这样的时刻 —— 明明付出了时间和精力，却因为一个小细节翻车。但没关系，这些 “小插曲” 都是经验，下次再做，就知道该避开哪些坑了。你做染色实验时，有没有过类似的经历呀？
互动时间：你的油红 O 染色 “小技巧” 是什么？
今天把细胞油红 O 染色的核心知识点都讲完了，从原理到步骤，再到试剂盒选购，希望能帮到正在做相关实验的你。
不过科研路上，每个人都有自己的 “小技巧”—— 比如你有没有试过调整孵育温度让染色更均匀？或者有没有私藏的 “不翻车” 试剂盒品牌？欢迎在评论区分享你的经验，也可以说说你做染色时遇到的问题，咱们一起讨论解决！
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