尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种神经元,不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。
实验原理
本次尼式染色实验采用甲苯胺蓝作为染料。甲苯胺蓝为碱性染料,其中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
实验视频
实验步骤
01
脱蜡至水:
二甲苯Ⅰ 15min
二甲苯Ⅱ 15min
95%酒精 30s
80%酒精 30s
75%酒精 30s
流水洗 30s
02
用免疫组化笔圈出待测组织
03
滴加甲苯胺蓝染液,室温染色45min(或置50℃~60℃烘箱染色10min)后,用水冲洗
04
用70%乙醇分化2分钟
05
分化后进行梯度脱水:
80%乙醇 2min
95%乙醇 2min
无水乙醇 4min
06
中性树胶封片
注:若分化不理想可退回70%酒精继续分化,但分化完全后请快速脱水,切勿分化过度,甲苯胺蓝法不可复染。
实验结果
软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。
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