组织学技术培训班讲义第一部分 基础准备工作一、玻片清洁新玻片:自来水冲洗或洗衣粉擦洗,清洁液浸泡1天以上,清水冲洗干净,95%酒精浸泡数小时或过夜,用干净的棉布擦干,置干燥箱或37~60℃温箱烤干旧玻片(带盖玻片的载玻片):酒精灯上加热除去盖片或放大量废二甲苯浸泡7天左右,盖片与载玻片分离,入肥皂水煮沸,自来水冲洗,清洁液浸泡1天以上,清水冲洗干净,95%酒精浸泡数小时或过夜,用干净的棉布擦干,置干燥箱或37~60℃温箱烤干。重染标本则经各级酒精下行至水,重新染色玻璃器皿清洗:包括量杯、量筒、烧杯、磨口瓶、细口瓶、广口瓶、三角烧瓶、容量瓶等二、常用试剂配制1 蛋白甘油:用眼科镊或拨针在新鲜鸡蛋尖端挑破一小孔,在另一端再挑一小孔并稍捅大,大端向下,蛋白流入烧杯,不要蛋黄。用玻棒将蛋白打成泡沫,倒入垫有几层纱布的漏斗过滤,得到清澈透明的液体。加等量甘油(Glycerine),摇匀,加麝香草酚(Thymol)或樟脑(camphor)(约1%)防腐。2 多 聚赖氨酸:取多聚赖氨酸( Poly-L-Lysine,PLL)10毫升加蒸馏水90毫升,置冰箱保存3 生理盐水:
氯化钠(Sodium chloride)0.85或0.9克溶于蒸馏水100毫升(哺乳类温血动物)氯化钠0.64克溶于蒸馏水100毫升(两栖类)
氯化钠0.75克溶于蒸馏水100毫升(鸟类)
氯化钠1.5~2.6克溶于蒸馏水100毫升(海生动物)4 卢戈氏(Lugol)碘液:蒸馏水100~200毫升,碘(Iodine)1克,碘化钾(Potassium iodide)2克5 苯胺水:苯胺油(Aniline )5毫升,蒸馏水95毫升,充分振荡,混匀后过滤。静置24小时使用6 盐酸酒精:70%酒精(Alcohol)100毫升,浓盐酸(Hydrochloric acid)0.5或1毫升7 石炭酸二甲苯(1:3~4):石炭酸(Carbolic acid)10克与二甲苯(Dimethylbenzene)30或40毫升混合8 碳酸锂饱和水溶液:蒸馏水100毫升加入碳酸锂(Lithium carbonate)至饱和(1.3%)9 碘酒:碘5克,95%酒精80毫升,蒸馏水20毫升10 5%硫代硫酸钠水溶液:硫代硫酸钠(Sodium hyposulfite)5克,蒸馏水100毫升11 梯度酒精:单位:毫升 10% 15% 20% 30% 35% 50% 60% 70% 75% 80% 90% 95%95%酒精 10.5 15.7 21.0 31.5 36.8 52.6 63.1 73.6 79.0 84.2 94.5 100
蒸馏水 89.5 84.3 79.0 68.5 63.2 47.4 36.9 26.4 21.0 15.8 5.5 0
第二部分 石蜡切片制作过程
一、材料选取与取材主要是人的材料,来源于手术活检、尸检等实验动物:来源广,容易获取,部分能代替人的正常组织;实验动物建模常用实验动物有:大小鼠、豚鼠、兔、猫、狗等1 选取合适的实验动物:肥大细胞:大、小鼠皮下组织及肠系膜、大网膜铺片;大鼠肠系膜肥大细胞颗粒不溶于水胰岛细胞:豚鼠胰腺尾部内耳(螺旋器):豚鼠内耳运动终板:小鼠肋间肌卵巢:猫卵巢可见各级卵泡嗅黏膜:狗(比人发达)环层小体:猫(肠系膜和足掌最多)叶状乳头:兔(最典型)结缔组织铺片:小鼠、大鼠