亲和层析填料rroteineads琼脂糖凝胶亲和层析介质(纯化树脂)亲和层析填料琼脂糖凝胶系列

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产品 介绍 :     Protein A 是一种分离自金黄色葡萄球菌的细胞壁蛋白, 主要通过 Fc 片段结合哺乳动物IgG,但是不与狗 lgG 结合,不结合人 lgM、lgD 和 IgA。蛋白 A 与蛋白 G 不同来源及亚类的免疫球蛋白结合能力丌一样,具体见表。天然 Protein A 有五个 IgG 结合区域和一些未知功能的区域,重组 protein A 去除了与白蛋白及细胞表面结合位点,只含有五个 IgG 结合区域,减少了非特异性吸附。

rProtein A Beads  产品性能 :

  Protein A  和   Protein G  对不同抗体的结合能力   :

++++=结合能力强;  ++=结合能力中等;  —=结合能力弱或没有结合 

纯化流程 :1 、Buffer  的准备

所用水和 Buffer 在使用之前建议用  0.22µm 或 0.45 µm 滤膜过滤。 结合/ 洗杂  Buffer:   0.15M NaCl,  20 mM Na 2 HPO 4 ,  pH 7.0洗脱  Buffer: 0.1M 甘氨酸,  pH 3.0中和液:   1M Tris-HCl, pH8.5

2 、 样品准备     上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和 pH 值, 可以用结合/洗杂缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用结合/洗杂缓冲液透析。     样品在上样前建议离心或用  0.22µm 或 0.45µm 滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。 3 、 样品纯化    1) 将 rProtein A Beads 装入合适的层析柱,层析用 5 倍柱体积的结合 Buffer 进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。     2) 将样品加到平衡好的 rProtein A Beads 中(保证目的蛋白与 rProtein A Beads 充分接触,提高目的蛋白的回收率) ,收集流出液。     3) 用 10-15 倍柱体积的洗杂 Buffer 进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。    

4) 使用 5-10 倍柱体积的洗脱  Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。     5) 依次使用 3 倍柱体积的结合  Buffer 和 5 倍柱体积的去离子水平衡填料,后再用 5 倍柱 体积的 20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的 20%的乙醇中,置于 4 度保存,防止填料被细菌污染。

4 、   SDS-PAGE  检测    将使用纯化产品得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE 检测纯化效果。 

填料清洗    rProtein A Beads 可以重复使用而无需再生, 但随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,严重影响柱子的性能,这时需要对树脂进行清洗。去除一些沉淀或变性物质用 2 倍柱体积的 6M 盐酸胍溶液进行清洗,然后立即用 5 倍柱体积的   PBS, pH 7.4 清洗。    去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质    用 3-4 倍柱体积的 70%乙醇或 2 倍柱体积的 1% Triton  X-100 清洗,然后然后立即用 5倍柱体积的   PBS, pH 7.4 清洗。 

问题及解决方案

亲和层析填料 rProtein A Beads琼脂糖凝胶亲和层析介质(纯化树脂)订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

运输说明:

1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

THE END
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14.索莱宝solarbio生化试剂酶·辅酶·抑制剂价格索莱宝生产的胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA(0.53mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。PMSF(100mM)品牌:Solarbio | 货号:P0100商品货号:商品品牌:规格基本售价:选择规格 P0100-1ml jvzquC41yy}/drtoctz/ew4kphutwyun{1>98:>6;84ivv
15.Gelatin取本品20g,置长颈圆底烧瓶中,加水50ml,放置使膨胀后,加稀硫酸50ml,即时连接冷凝管,用水蒸气蒸馏,馏液导人过氧化氢试液(对甲基红-亚甲蓝混合指示液显中性)20ml中,至馏出液达80ml,停止蒸馏;馏出液中加甲基红-亚甲蓝混合指示液数滴,用氢氧化钠滴定液(0.lmol/L)满定至溶液显草绿色,并将滴定的结果用空白试验校正,消耗氢氧化钠滴定液(0.ljvzquC41yy}/eqjodm4dqv4ep1iigv4Igngukw
16.猴骨髓中性粒细胞分离液试剂盒3. 离心后,离心管中可见两个环状乳白色层,上层为单个核细胞层,下层即所需中性粒细胞层(受 个体差异及分离条件影响,粒细胞白膜层可能会出现颜色较浅的情况)。 4. 用吸管吸取下层中性粒细胞白膜层至新的离心管中,加入 10mL 细胞清洗液洗涤细胞,250g,离心 10min。 5. 弃上清,加入 5mL 细胞清洗液重悬细胞,jvzquC41yy}/uxqctdop0lto1iupf|2346=80qyon